呈色反应

贡献者:星晨炼 类别:简体中文 时间:2022-07-15 15:48:25 收藏数:8 评分:0
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呈色反应
蛋白质能与许多化学试剂发生显色反应,
根据这些颜色反应可以对蛋白质进行定性、定量分析。
比如,
(yin)茚三酮反应,
氨基酸与茚三酮水合物共热,可生成蓝紫色化合物。
因为氨基酸上的氨基(-NH2)在反应中可产生游离氨,
它能促使两分子的茚三酮聚合为蓝紫色化合物。
这种蓝紫色化合物的最大吸收峰在 570nm(纳米)处,
且其吸收峰值与氨基酸的含量存在正比关系,
可作为氨基酸定量分析的方法。
同样,
蛋白质分子上也存在氨基,
故此法也可用于蛋白质的定量分析,
但由于蛋白质分子的氨基含量较少,
且不同蛋白分子所含氨基数量也有差别,
故一般不作为蛋白质定量的主要方法。
另外,
蛋白质水解可产生氨基酸,
蛋白质水解后产生的氨基酸也可发生茚三酮反应。
因此常常用来检测蛋白质的水解程度,
即蛋白质水解程度越高,其蓝紫色越深。
同理,
也可以检测氨基酸合成蛋白质的效率,
即效率越高,其蓝紫色越浅。
再如,
双缩脲反应
蛋白质和多肽分子中的肽键
在稀碱溶液中与硫酸铜共热,呈现紫色或红色,
此反应称为双缩脲反应。
这一反应不仅可以测定蛋白质溶液含量,
而且与刚刚讲过的茚三酮同样道理。
它也可以用来检测蛋白质水解程度或氨基酸成肽效率:
即水解程度越高,其颜色越浅,
成肽效率越高其颜色越深。
此外,
蛋白质还有其他一些重要的呈色反应,
如,
酚试剂法,
它的灵敏度比双缩脲反应高 100倍。
此外,
还有灵敏度更高的考马斯亮蓝法。
它的 最低蛋白质检测量可达到 1个微克(ug)。
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