遗传标志筛选-标志补救

贡献者:星晨炼 类别:简体中文 时间:2022-09-28 09:08:28 收藏数:2 评分:0
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遗传标志筛选-标志补救
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利用遗传标记选择
还有一种非常简便的、非常直观的筛选方法
叫做 标志补救。

最常用的是 蓝白筛选。
让我们从肉眼上 马上区分出
哪些是 阳性的,哪些是阴性的。

利用蓝白筛选
取决于
载体 和 受体 两部分,
在载体上 有一个编码基因,
在染色体 DNA 上 也有一个编码基因,
它们各自经过翻译之后,也会得到一个相应的蛋白质。

但是这两个蛋白质
它是一个相互作用的整体,缺一不可。

只有在 含有这种质粒的 这种细菌,
它的两个编码蛋白产物 才能够组合成一个正确的功能性的蛋白。
这是一个酶蛋白,
它能够发挥催化作用。

而我们恰好利用了这个特点,
我们把这种 质粒 当作 载体,
把这个载体 作为 重组的质粒的来源切开。

但是切的时候
恰好把它的编码蛋白的序列给破坏掉,
把你的外源的 目的 DNA 加进去了。

让这样的重组质粒
再 进入 这种受体细胞,
就不能再有功能性的酶蛋白产生。

因为质粒上的那个编码蛋白序列
已经被外源编码添加进去了。

所以含有这种真正重组的质粒
它是不可能具有原来酶的活性的。

那么做实验时,
在屏板上 就要加入这种酶的 底物。

只有在真正原始的质粒 和 细菌 共处的时候,
酶有活性,
把那个底物 分解了,
白色 就变成 蓝色了。

而加了 目的 基因的 阳性重组体,
因为不能编码出 那个蛋白质,
整个酶的活性,是丧失掉的。
那个菌落不能被转变成蓝色。

简单介绍蓝白筛选的原理。
以上都是遗传标志的筛选。
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