什么 DNA 可以作为载体?
什么 DNA 可以作为载体?
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实际上,
根据我们的研究目的不一样,
载体也是有区别的。
→
载体可以是携带目的 DNA 片段 进到宿主细胞,
也可能需要利用它进行扩增,
或者利用它进行一些表达,
这样的 DNA 就称之为载体。
→
在实际工作中,
最主要的环节 是想把 目标 DNA
在某一个宿主细胞内 大量地去表达,
这时就会用到 克隆载体。
→
如果你想把 目的 DNA 在某一些细胞里边
让它得到它的蛋白产物,
那就要用到 表达载体。
→
克隆载体
携带目的 DNA 片段,
并且在宿主细胞里实现了 DNA 的大量的繁殖和扩增。
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克隆载体的基本特点:
→
克隆载体 首先必须能自我复制,说明它必须有复制起点。
→
作为载体 还必须有简便的方法把它 选择、鉴定出来,
所以这样的 DNA 分子里 必须有供选择的一些标记。
→
还有,
用载体的目的 是携带更多的目的 DNA,
所以首先用内切酶 把载体切开,把目的 DNA 加进去。
所以好的载体上 应该具有 多个内切酶的单一位点,
这样的位点叫做 多克隆位点,
这是最好的载体。
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按照这样的原则,
质粒 是经常被选择作为载体。
→
质粒来源于细菌,
因为在细菌体内 除了 染色质 之外,
还有一个 小分子的 环状双链 DNA。
它和细菌的染色体本身 是有别的。
→
这样的 小分子环状双链 DNA 就是 质粒。
它能够具备自主复制的能力,
它也能够遗传给后代,
并且它有抗药性标志这样的遗传基因。
方便我们后续过程 把它给选择出来。
当然它也具有多克隆的位点。
→
质粒是最常用到的 工具载体。
→
但是质粒也有它的缺陷,
为了容纳大片段的 DNA,
我们还可以采取 噬菌体 作为载体,
甚至有时候用一些 病毒的 DNA ,
还有经过人工改造的 酵母 DNA,
这也都是可以利用作为载体的。
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实际上,
根据我们的研究目的不一样,
载体也是有区别的。
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载体可以是携带目的 DNA 片段 进到宿主细胞,
也可能需要利用它进行扩增,
或者利用它进行一些表达,
这样的 DNA 就称之为载体。
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在实际工作中,
最主要的环节 是想把 目标 DNA
在某一个宿主细胞内 大量地去表达,
这时就会用到 克隆载体。
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如果你想把 目的 DNA 在某一些细胞里边
让它得到它的蛋白产物,
那就要用到 表达载体。
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克隆载体
携带目的 DNA 片段,
并且在宿主细胞里实现了 DNA 的大量的繁殖和扩增。
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克隆载体的基本特点:
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克隆载体 首先必须能自我复制,说明它必须有复制起点。
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作为载体 还必须有简便的方法把它 选择、鉴定出来,
所以这样的 DNA 分子里 必须有供选择的一些标记。
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还有,
用载体的目的 是携带更多的目的 DNA,
所以首先用内切酶 把载体切开,把目的 DNA 加进去。
所以好的载体上 应该具有 多个内切酶的单一位点,
这样的位点叫做 多克隆位点,
这是最好的载体。
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按照这样的原则,
质粒 是经常被选择作为载体。
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质粒来源于细菌,
因为在细菌体内 除了 染色质 之外,
还有一个 小分子的 环状双链 DNA。
它和细菌的染色体本身 是有别的。
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这样的 小分子环状双链 DNA 就是 质粒。
它能够具备自主复制的能力,
它也能够遗传给后代,
并且它有抗药性标志这样的遗传基因。
方便我们后续过程 把它给选择出来。
当然它也具有多克隆的位点。
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质粒是最常用到的 工具载体。
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但是质粒也有它的缺陷,
为了容纳大片段的 DNA,
我们还可以采取 噬菌体 作为载体,
甚至有时候用一些 病毒的 DNA ,
还有经过人工改造的 酵母 DNA,
这也都是可以利用作为载体的。
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