工具酶

贡献者:星晨炼 类别:简体中文 时间:2022-09-27 08:33:11 收藏数:0 评分:0
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内切酶它把我们的 DNA 片段切开了,
当我们把不同来源的 DNA 加到一起的时候,
还需要有连接酶 来连接。

这个连接酶 它连接的是 3’,5’-磷酸二酯键,
当把两个不同来源的 DNA 放在一起的时候,
最好是使得这两个 DNA 片段 的末端,
处于 粘性末端。

首先,
以粘性末端的后补 形成了一个后补配对,

之后,
再利用连接酶 把断裂的连接口
给它形成一个 3’,5’-磷酸二酯键。

这样的话,
就把不同来源的 DNA 组装成为 一个整体了。

这样的内切酶 和 连接酶共同使用
就可以完成我们的重组,
但是强调的是
最好采取粘性末端的内切酶。

例如,
在目的所在的 DNA 染色体上,
我们选择了两种内切酶,
两种内切酶 采取的都是 粘性末端,
所以切割之后,
中间的这一段 恰好是需要的 目的 DNA。

那要把它 和 另外一个 载体 DNA 连接起来,
因为用了粘性末端。
用这两个酶 同样也去切 载体,
载体切除的末端,恰好也和 目的基因 的两个末端是呈互补状态。

把它们放在一起之后
自然首先有了一个氢键的互补形式。
之后,
连接酶再把二者完整的连接在一起。

所以工具酶要选择恰当,
有利于后续的技术过程。
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